北京哪家医院治疗白癜风治的好 https://wapjbk.39.net/yiyuanzaixian/bjzkbdfyy/噪声性耳聋(noise-inducedhearingloss，NIHL)是长期接触噪声刺激引起的缓慢进行的感音神经性聋，又称慢性声损伤(chronicacoustictrauma)，不同于一次高强度脉冲噪声瞬时暴露所引起的急性声损伤(acuteacoustictrauma)，如爆聋(explosivehearingloss)。
NIHL发生机制仍不清楚，目前有3个方面的可能理论
1)机械理论:噪声加速耳蜗迷路内的淋巴液流速，严重噪声可导致涡流出现，涡流使耳蜗螺旋器受到创伤，如毛细胞等的创伤。(2)代谢理论:Bohne等报道较强噪声可以增加耳蜗组织细胞代谢，从而增加了耗能，当能量衰竭时使听力下降，这可能是耳聋的重要因素之一。(3)血管理论:噪声较强时，耳蜗毛细胞等结构发生微循环障碍，进一步导致耳蜗缺血、缺氧，造成毛细胞和螺旋器损伤。
天麻素是天麻的主要成分，化学成分是对羟基苯甲醇-β-D葡萄糖苷，用其治疗感音神经性耳聋、耳鸣，有效率较高。笔者前期研究表明，天麻素在预防噪声性耳聋上有效。本实验通过对ABR及耳蜗毛细胞的细胞形态及代谢的观察旨在进一步确认天麻素对NIHL的预防作用及治疗作用，同时探讨可能的作用机制，实验如下。
材料与方法
1.实验对象与主要材料:50只体重均为~g的健康、无耳疾以及耳廓反射灵敏豚鼠(雄性，中国科学院上海实验中心提供);天眩清(云南昆明制药股份有限公司，规格:mg/2ml);NGT-Ⅱ型脑干诱发电位仪(中国科技大学生物技术有限公司);光学显微镜(OLYMPUS-CH普通光学显微镜，OLYMPUS公司);氯化硝基四氮唑蓝(华美医药公司，0.25克/瓶)。
2.实验分组:纯白红目雄性豚鼠50只随机分5组:用药方式均予腹腔注射;剂量:mg/kg、1ml/kg。(1)预防实验组(12只):将动物置于噪声环境下提前3天即注射天麻素，每日注射，3天后再连续7天噪声暴露，每天开始暴露噪声前4h注射。(2)预防对照组(10只):同期注射等量注射用水。(3)治疗实验组(10只):首先噪声暴露连续7天，结束后次日开始注射天麻素，剂量、方式同预防组，连续10天。(4)治疗对照组(10只):同期注射同实验组药物等量的注射用水。(5)正常组(8只):不给噪声及药物。
3.NIHL模型建立方法:豚鼠放在隔音室内同平面铁笼，周围环境噪声20~25dB。使用磁带录制AC-40型高频测听仪发出的噪声。此噪声为宽频稳态白噪声，扩大后经扬声器再输出。AWAB型声级计监测强度dB。同条件下予以持续暴露噪声4h/d，连续7天。
4.标本收集及指标检测1)听性脑干诱发电位(ABR)测试:实验前、后均各测1次ABR，各治疗组动物在噪声暴露结束时增加测1次。动物麻醉后置于隔音室内使用NGT-Ⅱ脑干诱发电位仪进行ABR测试，保持体温37℃左右。刺激声:带通滤波30~0Hz的滤波短声，均以Ⅲ波为基准用以确定ABR反应阈。(2)耳蜗基膜铺片毛细胞形态学(外毛细胞损伤率)观察:采用基膜硬铺片法及硝酸银染色法判断外毛细胞损伤标志，外毛细胞境界模糊、细胞碎裂、缺失为标准。倍光学显微镜下观察第一、二、三回基膜外毛细胞变化。由于蜗尖不易取全，且外毛细胞排数不等，所以计算第一、二、三回中下部3个视野下毛细胞计数损失率，统计学比较时以正常组均数为基准。(3)耳蜗毛细胞琥珀酸脱氢酶标本制作及观察:采用苏鸿禧、阮芳铭耳蜗琥珀酸脱氢酶组织化学染色法。取出动物听泡后显微镜下分离耳蜗基膜及盖膜。基膜封片后光镜下观察琥珀酸脱氢酶蓝染改变。
5.统计学方法:计量资料均以均数±标准差(x±s)表示，用SPSS11.5软件处理，采用方差分析，组间比较LSD方法，P＜0.05为差异有统计学意义。
结果
1.ABR反应阈:4组动物予以噪声造模后，各组ABR反应阈值显著高于正常组(22.18±2.56dB，P＜0.01)。预防实验组实验前ABR为20.56±2.62dB，实验后47.04±8.54dB;预防对照组实验前ABR为25.69±6.21dB，实验后57.50±7.69dB;实验后预防实验组(47.04dB)阈值显著低于预防对照组(57.50dB)阈值(P＜0.01)。图1为预防组ABR反应阈变化。
治疗组各组实验前后ABR反应阈变化见表1。
治疗后治疗对照组(53.50dB)与治疗实验组(54.25dB)组间无显著差异(P＞0.05)。表1同时表明治疗对照组及治疗实验组在噪声暴露后至处死前ABR反应阈有所恢复，但二者对比恢复程度相差甚微，治疗对照组与治疗实验组平均恢复各为4.25和3.75dB(P=0.74)。
2.耳蜗基膜铺片观察结果1)一般形态:正常组耳蜗外毛细胞排列整齐，形态结构正常，无细胞肿胀，无明显细胞缺失。预防实验组外毛细胞较肿胀，排列较紊乱、有少量缺失(图2)，而预防对照组、治疗对照组、治疗实验组外毛细胞损伤严重，其缺失、排列紊乱、细胞肿胀情况均较重，尤以第一、二回为甚，第三回相对减轻。(2)耳蜗外毛细胞计数:如表2及图3示，倍光镜下观察，外毛细胞损失率以预防实验组值最小(22.7%)，预防对照组、治疗对照组、治疗实验组缺失率分别为43.6%、41.9%、43.0%。同时观察到各组多以第一、二回毛细胞损失为重，第三回相对减轻。与正常组比较，各组差异均有统计学意义(P＜0.01)。而各组外毛细胞总数比较，预防实验组与预防对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)，治疗对照组与治疗实验组比较则差异无统计学意义(P＞0.05)。
3.耳蜗毛细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)变化:琥珀酸脱氢酶染色法是组织细胞中琥珀酸脱氢酶使SDH作用液中琥珀酸被氧化，脱下氢离子使硝基四氮唑蓝还原为蓝色的二甲蓝沉淀，蓝色沉淀的区域反应该酶活性的区域。铺片法观察到耳蜗各回毛细胞中SDH染色情况变化。预防实验组SDH染色区与预防对照组比较蓝色染色区显著增多(图4);治疗对照组与治疗实验组比较光镜下观察染色情况则无明显差异。
讨论
本次实验应用dBSPL稳态白噪声对豚鼠进行暴露(持续4h/d×7d)，经暴露后各组动物耳蜗外毛细胞均有不同程度损伤，但内毛细胞损伤不明显。这与笔者前期研究相一致。而且毛细胞的损伤严重程度以基底回至第三回有所递减，这与以往研究结果相符。说明dBSPL稳态白噪声主要损伤的是耳蜗外毛细胞，对内毛细胞的损伤是轻微的，而且损伤外毛细胞基底回及第二回尤为明显。4组受噪声暴露的动物ABR反应阈值均有明显增高及延长，这些提示噪声性声损伤早期可能以蜗性损伤为主。
噪声使毛细胞能量耗竭，是导致耳聋重要因素之一。有研究报道，声音由外界经耳蜗传入中枢系统，发生了能量增大。氧化还原反应则提供给细胞能量ATP，反应的速度又由反应酶调控，这极可能发生在耳蜗。噪声使毛细胞代谢加速，使其能量衰竭可能是耳聋重要因素。
耳蜗毛细胞含有大量琥珀酸脱氢酶。三羧酸循环是生成ATP的主要氧化还原反应，此循环反应中仅有琥珀酸脱氢酶与细胞内膜结合，参与细胞琥珀酸氧化呼吸链(FADH2氧化呼吸链)从而生成ATP，以供细胞获能。本实验通过毛细胞琥珀酸脱氢酶蓝染情况，观察细胞代谢改变。本实验结果显示，噪声暴露后耳蜗毛细胞的琥珀酸脱氢酶蓝染均有程度不同的缺染，说明噪声对毛细胞的琥珀酸氧化呼吸链破坏显著，进而减少了能量的生成，加速了能量代谢的衰竭。
本实验据ABR、毛细胞形态学及毛细胞SDH蓝染变化为观察指标，结果表明天麻素预防实验组ABR反应阈以及毛细胞损伤率显著低于预防对照组。这表明天麻素能够预防噪声性耳聋，证实了前期研究。有报道天麻对豚鼠耳蜗听阈值有保护作用。
本实验中，观察到天麻素对噪声性声损伤有一定的预防作用，可能与以下机制相关:天麻素能保护细胞膜;增加其稳定性，减轻细胞的缺血再灌注创伤。同时天麻素增加细胞内糖原、三磷酸腺苷酯、琥珀酸脱氢酶含量，增加能量供应;尤其促进细胞乏氧状态下的获能。本实验显示，预防实验组的外毛细胞的损伤率和琥珀酸脱氢酶蓝染缺乏显著低于对照组。综上所述，天麻素预防NIHL主要作用机制之一可能是保护了细胞膜的稳定性以及琥珀酸脱氢酶(其是三羧酸循环反应中唯一与细胞内膜结合的酶)，从而促进耳蜗细胞能量代谢、增加了细胞获能的功能。
本次实验过程中，天麻素在治疗噪声性声损伤方面与对照组比较无明显统计学差异，表明其对听力系统的治疗作用不明显。这可能由于噪声所造成的听觉系统损伤如毛细胞的死亡等具有不可逆性，一旦毛细胞受到严重损害甚或死亡，就很难用药物来治愈。正是从这一点上讲，预防比治疗更重要，噪声性耳聋重在预防。
来源：医学研究杂志
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